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病理诊断实验室装修

病理诊断实验室装修SICOLAB

国家卫计委 2014年发布的《临床实验室生物安全指南》中指出,临床实验室应参照二级生物安全实验室( BSL-2) 实现分区及分流。 实验室应根据自身需求,以“各区独立,防止污染”为原则。


一、实验功能区


1、样本接收区: 接收临床送检的体液及石蜡样本,核对患者信息,对所接收的样本进行登记编号,体液样本置于4 ℃ 保存,及时处理。
2、样本前处理区: 用于组织切片、脱蜡、染色及血液、尿液、胸腹水等标本的离心、涂片、染色等。体系突变检测时,需对组织学或细胞学样本进行病理质控,目的是进一步明确病变组织或细胞与病理诊断是否一致; 评估肿瘤细胞的比例是否达到检测要求; 确定肿瘤细胞位置,富集肿瘤细胞,避免出血、坏死、间质细胞影响 DNA 质量。因该区域使用二甲苯等有毒有害物质,需设置通风橱,做好化学安全防护,且配有废液桶,废弃的二甲苯等化学污染物统一回收处理。
3、试剂暂存及准备区: 试剂暂存区需配备4 ℃ 和 - 20 ℃ 以下冰箱,按照试剂储存条件分别储存,并记录使用情况。准备区根据反应体系,配制各反应试剂。
4、样本制备区: 石蜡样本癌组织的富集、样本的消化、DNA 和 RNA 的提取及 OD 值的测定。该区域安置外排式二级生物安全柜,降低实验过程中产生的有害气溶胶对实验人员和环境的危害。特别是用于检测胚系突变的血液样本和携带各种病毒的样本,均需在生物安全柜内完成操作,做好生物安全防护。如有计划开展通过超敏感的方法对血液中微量的循环 DNA 进行检测的项目,本区域需独立划分用于提取微量循环 DNA 区域,防止其他样本高
浓度的 DNA 对微量循环 DNA 的污染。
5、核酸片段化区: 样本核酸的打断。该区域可能产生核酸气溶胶,属于核酸污染区,需要做好相应防护的清洁处理。
6、PCR 扩增一区: 第 1 次 PCR 扩增。在 PCR 过程中可产生大量短片段的核酸,是核酸气溶胶的重要来源。该区域属于核酸污染区,需要尽量避免 PCR 反应时的爆管和 PCR 反应后开盖,一旦发生要做好记录并及时做好核酸污染的清洁处理,并监测空气中是否已经存在气溶胶。
7、产物分析区: 对 PCR 产物或打断后的核酸进行电泳检测。核酸片段化分为机械打断和酶消化打断,机械打断后需要对产物进行电泳检测,评估核酸片段化状态。该区域存在核酸片段化后或 PCR 扩增后产物开盖的操作,也是核酸气溶胶重要来源的区域,属于核酸污染区。
8、纯化一区: 第 1 次 PCR 产物纯化、第 1 次杂交、第 1 次捕获、第 2 次杂交、第 2 次捕获及捕获样本纯化。该区域存在PCR 扩增后产物开盖的操作,是核酸气溶胶重要来源的区域,属于核酸污染区。
9、PCR 扩增二区: 第 2 次 PCR 扩增。注意事项同 PCR 扩增一区。
10、纯化二区: 第 2 次 PCR 产物纯化及文库检测。注意事项同纯化一区。
11、测序区: 放置测序仪,进行上机测序。该区域自身不产生核酸气溶胶,但需要采取防止被气溶胶污染的措施,属于核酸半污染区。
12、数据分析区: 数据处理分析,结果解读及报告打印。该区域自身不产生核酸气溶胶,属于核酸半污染区。
若建立荧光原位杂交技术检测平台,需独立设置以下两个区域: 
    1、荧光原位杂交区: 此区域主要进行低渗、预固定、固定、滴片、老化、消化、洗片、变性、杂交、再洗片等工作,该区域处理可能携带生物危害物的血液、骨髓、尿液或其他体液,需配备生物安全柜或通风橱,预防生物污染物对工作人员的伤害。
    2、荧光原位杂交观察区: 避光、安置荧光显微镜,观察结果。

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二、实验准备区


1、高温灭菌室: 配备高压蒸汽灭菌器和高温烘箱,设备功率较高,需单独线路配电。因高压蒸汽设备,该区域空气交换 12 次/ h。
2、危险品仓库: 该区域应远离实验室和办公区,安全出口通畅。所有危险化学品必须存放到铁柜中,对于有腐蚀性、易燃易爆性的试剂,采取防、腐防爆和通风措施,且铁柜上加装挂锁,钥匙专人保管。危 险品仓库应配有灭火器和灭火沙桶,做 好 防 火 工 作。 
3、一般仓库: 存放移液器吸头、离心管等,紧贴墙壁安装货架,将各类耗材按序排放,便于取用。

4、试剂储存间: 试剂储存分为室温储存( 18 ℃ - 26 ℃ ) 、冷藏储存( 2 ℃ - 8 ℃ ) 和冷冻储存( - 20 ℃以下) ,试剂储存间的冰箱和冷冻柜产生大量的热,需安装通风系统,注意环境温度的控制。冰箱和冷冻柜应装配带警示的温度监测系统,当温度异常时发出警报,工作人员可及时处理,避免试剂失效。


三、办公区


该区域主要用于实验人员工作、学习、休息场所,为洁净区,需要远离生物污染区和危险品仓库。对于步骤多、流程长的检测平台,为防止污染,实验室功能区设计尽量细分。如果实验室有多个检测技术平台,根据使用仪器的功能,可适当合并功能区。 
实验室的污染分为生物污染和核酸污染,生物污染主要是在处理体液样本的区域,而核酸污染主要在核酸提取、扩增和分析的区域。据此,应将实验室划分为以生物污染对象的生物污染区、生物半污染区和生物洁净区,也可以将实验室划分为以核酸污染对象的核酸污染区、核酸半污染区和核酸洁净区。


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